PCR and analysis: ke eng? Tsela ea ho nka tshekatsheka PCR

E se e le nako e telele months ago ba qapa tšepahala, haholo nahanela le ka potlako mokhoa bakeng sa fumanoe ea mafu a sa tšoaneng a tšoaetsanoang ka batho. mokhoa o joalo o bitsoa "PCR and analysis". Ke eng, seo ke le hantle lona, seo a ka khetholla microorganisms le kamoo ho ka e nka, re tla hlalosa ka sehlooho sena.

History of sibolloa

O ile a qapa le polymerase ketane itšoara joang (PCR) ke American rasaense Keri Myullis ka 1983. Qalong, patented mokhoa oa tepelletse maikutlong ke "Cetus Corporation," eo a neng a sebelitse le 'mōpi ea lona. Empa ka 1992 litokelo tsohle le dipatenteng ne rekiswa ho khamphani "Hoffman-La Roche." Ka mor'a moo, ho ile ha fumaneha hore lithuto tse tšoanang li ne li etsoa e tšoanang 'me ba tlalehile ka litsebi tsa baeloji tse ling United States, tse kang Elis Chen, David Edgar, John rre. Ka 1980 o ile a kopanela ka taba ena le bo-rasaense ba Soviet A. Slyusarenko A. Kaledin le S. Gorodetsky. Ka hona, ho fumana hore na feela mong'a litokelo ha e bile ho ka khonehang. Tse ngata biochemists e ikhethang, li kentse letsoho khōlong ea mekhoa ea polymerase itšoara joang le CERN patented dipopontshwa bona. Ka and analysis ena ntlha ya PCR e phethahatsoa ho pholletsa le dilaboratiriamong ho khethehileng a hlomelloa.

Kakaretso PCR tekotshupo

PCR and analysis: ke eng le hore na ha e sebetse? Motheo oa mokhoa o larileng ka ka ha e le hantle hore ka ho sebelisa e khethehileng potlakisang tsebetso ea lik'hemik'hale DNA polymerase ka vitro ho eketseha ka bophahamo ba modumo itseng tikoloho ya likokoana-hloko tse. Ho etsa ka makhetlo-khetlo la ata fumaneha DNA boitsebiso boo. Kahoo, ho ba teng ha pathogen e ka sampole ea chelete li tla eketseha ka a bale litsenyehelo ea skeletal laboratori ea mellwane, 'me libaktheria li ke ke e-ba thata ho lemoha ka ho ya microscope ho.

Joang ho ithuta boitsebiso boo?

Ho phetha and analysis hlokahalang:

• DNA thempleite;
• primers lintho tse bonahalang o tlohang lipheletsong tsa sekhechana sa;
• thermostable DNA polymerase potlakisang tsebetso ea lik'hemik'hale;
• lik'hemik'hale, netefatsa tshebetso e nepahetseng ka potlakisang tsebetso ea lik'hemik'hale;
• pafara tharollo e hlokahalang ho bōpa maemo a loketseng bakeng sa kgolo le ntshetsopele ya lintho tse bonahalang DNA.

Ho phetha PCR sebetsa 25-30 phetang e entsoeng ka mehato e meraro: denaturation, annealing le elongation.

Ho sekaseka polimezarnoy ketane itsoara joang ka ho sebelisa mochine o khethehileng - cycler. thepa ea kajeno lumella u ho kenya hlokahala futhumatsang le methapo tsidifatso lenaneo ho felisa liphoso nakong tepelletse maikutlong ka.

Moo ho sebelisa fumanoe joang?

Polimezarnoy mokhoa ketane itsoara joang ka sebelisoa masimong a sa tšoaneng ea phekolo:

• tšebeliso forensiki ho khetholla lintho tse bonahalang le liphatsa tsa lefutso tse kang moriri, mathe kapa mali;
• PCR ho hlahloba mali a thusa ho genotyping, mohlala bakeng sa ba bonoa ba motho ka mong le liphatsa tsa lefutso lema arabela sethethefatsi itseng;
• ke mokhoa beha likamano tsa lelapa pakeng tsa batho;
• ho fetisisa o ile a batla-PCR mokhoa o fetohile ka fumanoe meriana ho boikemisetso ba mafu a sa tšoaneng a tšoaetsanoang.

Seo tšoaetso ea senola PCR?

Kahoo, moriana o nako e telele e ka katleho sebediswa PCR hlahlojoe. ke eng ho eona, re ba se a ntse a ithutile tsona. 'Me ba bang likokoana-hloko a ka lemoha le eona? PCR fumanoa latelang tsoaetsanang :

• hepatitis A, B, C;
• ureaplasmosis;
• candidiasis;
• chlamydia;
• mycoplasmosis;
• baktheria vaginosis;
• tšoaetsanoang mononucleosis;
• trichomoniasis;
• HPV tshwaetso;
• lefuba;
• herpes tshwaetso ya 1st le mofuta 2nd;
• Helicobacter pylori tshwaetso;
• cytomegalovirus;
• metso o mosoeu;
• salmonellosis;
• tšoaetso ea HIV.

Hape, mekhoa PCR sebelisoa ka phumano ya kankere.

menyetla ya mokhoa

Diagnostic PCR na le melemo 'maloa:

1. Phahameng nahanela. Esita le tse seng kae feela DNA limolek'hule kokoana-hloko PCR and analysis rerang ho ba teng ha tšoaetso. E thusa mokhoa bakeng sa mafu a sa foleng le latent etsahalang. Hangata e le ka Maemong a joalo, ho kokoana-hloko e sa lengoa ka litsela tse ling.
2. E le hore re batlisise lintho tse bonahalang efe kapa efe loketseng, tse kang mathe, mali, khetha ho kopanela liphate, le moriri o, lisele tse epithelial. The atileng ka ho fetisisa ke teko ea mali le urogenital swab PCR.

3. A hloke e atoloswa ho hōla litso. The km gana tshebetso ya ho tlhathoba dumella ho fumana diphetho tsa thuto ea ka mor'a lihora tse la 4-5.
4. mokhoa ke hoo e ka bang ka ho feletseng ka tšeptjoang. Tlalehiloeng mabokosana feela ka thōko ba bohata.-mpe lebaka.
5. Bokhoni ba ho khetholla mefuta e 'maloa ea likokoana-hloko ka lintho tse bonahalang' ngoe sampole. Sena ha se feela lebelo ho fihlela ho tshebetso ya ho fumanoe ya lefu lena le, empa e boetse e haholo ho fokotsa ditjeo tse bonahalang. Hangata, ngaka alakisi e and analysis akaretsang ya PCR. Theko phuputso e entsoeng, e bopilweng ka beha likokoana-hloko tse tšeletseng, ke ka 1.500 li-ruble.

Dikgothaletso ka lokisetsa and analysis

diphetho hore e be e sebetsang le lithuto tsa PCR hloka ho lekoa, latelang likhothaletso la litokisetso selelekela tsa phumano ya:

1. Pele fana ka puo ea mathe le lokela ho qoba ho ja le ho sebelisa lithethefatsi bakeng sa ho lihora tse 4 pele ho mohlala boitsebiso boo. Hang-hang pele ka mokhoa o sa, rinse molomo oa hao ka metsi phehiloeng.
2. Melao holimo lokela ho tataisoa le ha etellang sampole ho tswa ho ka hare ho lerameng. Mora rinsing e kgothaletswa ho etsa sililoa leseli ka letlalo ho lokolla maro prostatic.
3. Moroto hangata bokella lapeng. Ho etsa sena, o lokela ho ea tsamaisa ntloana ka botlalo feditsweng. Ka nyopa setshelo polasetiki ho hlokahala hore ho bokella 50-60 di ml moroto. Ho buelloa hore basali ba ngola tampon ka hara botshehadi 'me banna ba ka hohle kamoo ho ka khonehang ho hula letlalo mene ho etsa bonnete ba e hloekile boitsebiso boo. U ke ke ua nka lintho tse bonahalang tse ka nako ya menses.
4. Bakeng sa phumantsho ya peō ea botona ho ila kopanela liphate ka nako ya matsatsi a 3 pele ho pokello ea lintho tse bonahalang. Hape, lingaka ba eletswa ho tlohela tšebeliso ea Sauna le chesang ho hlapa, joala le lijo tse dinoko. Bakeng sa lihora tse 3 pele ho and analysis ke ho hlokahala hore ho qoba ho ntša metsi.
5. Ho fetisa smear 'urogenital, ho etsa mohlala, haeba ho and analysis ka chlamydia PCR, ka bobeli banna le basali ba e buella hore motho a phomole thobalano bakeng sa matsatsi a 3. libeke tse 2 pele ho and analysis le ke keng la nka lithibela-mafu. Bakeng sa beke o lokela ho ba khaotse ho sebedisa e haufi-ufi baengele, ditlotso, ka bosaling suppositories, douching. 3 lihora tse pele ho ithuta ho lokela ho qoba ho ntša metsi. Nakong ea ho ilela khoeli terata tse bonahalang e sa atlehe, matsatsi a 3 feela ka mor'a hore ho felisoa ha spotting ka e nkang urogenital smear '.

PCR nakong ea bokhachane

The emetse nako bakeng sa lesea, mafu a mangata a tšoaetsanoang, mafu a tšoaetsanoang ka ho kopanela liphate, ke kotsi haholo bakeng sa ntshetsopele tloaelehile fetal. STDs se ka mo lakalisa ntshetsopeleng intrauterine, senyeheloa kapa pele ho nako ea tsoalo, malformations congenital ea ngoana. Ka hona, ke habohlokoa ho fumana ka ho ima, mathoasong a screening PCR. Feta and analysis hlokahala ha ngodisa - ho fihlela ho libeke tse 12.

Terata lintho tse bonahalang le tsoa kanale cervical le o tlhobosa khethehileng. Tsamaiso e ke bohloko le ho beha ha ho kotsi ho lesea. Ka tloaelo nakong ea bokhachane hlahlobisisa bakeng Chlamydia PCR mokhoa, hammoho le ureaplasmosis, mycoplasmosis, cytomegalovirus, herpes, papillomavirus. Joalo rarahaneng tlhlahlobo bitsoa PCR 6.

PCR ya phumano ea HIV

Ka lebaka la 'nete ea hore mokhoa oa ho polymerase ketane itsoara joang ka e ela hloko haholo ho liphetoho' meleng le maemo a tepelletse maikutlong, lintho tse ngata li ka ama sephetho. Ka hona PCR and analysis bakeng sa tšoaetso ea HIV ha se mokhoa ka tšeptjoang, bokgoni lona - 96-98%. Tse setseng 2-4% ea teko eo e fana ka litholoana tse molemo tsa bohata.

Empa ka ba bang ba maemo a ka ntle ho PCR phumano ea HIV ke ke a etsa. Ka tloaelo, e etsoa ho batho ba nang le bolumeli ba bohata-mpe ELISA. lipalo tsena li bontša hore motho eo a e-s'o ntshetswa lisireletsi ho kokoana-hloko e le a ke ke a lemoha ka ntle ho eketseha palo ea tse ngata. Hore sena se ka finyelloa ka ho khanna teko ea mali PCR mokhoa.

Hape ho hlokahala ke tepelletse maikutlong tsa bana ba selemo sa pele sa bophelo, born ho bo-'mè ba nang le HIV. mokhoa ke tsela feela ea ho tshepahala beha boemo ba ngoana eo.

PCR ya phumano ea lefu la sebete

Polymerase ketane itsoara joang ka mokhoa o dumella phumano ea DNA ea kokoana-hloko ea lefu la sebete A, B, C, hantle pele sebopeho sa lisireletsi ho tshwaetso kapa letšoao qala. Haholo-holo e atlehang ke PCR and analysis ka hepatitis C, kaha 85% ya lefu joalo ke asymptomatic a bile a sa kalafo e nakong fetoha bo sa foleng.

Ka nako e loketseng ba bonoa ba pathogen ho tla re thusa hore re qobe mathata le ho nako e telele kalafo.

Setshehetso sa PCR screening

Akaretsang PCR Analysis: ke eng? Sena screening mokhoa polimezarnoy ketane karabelong e akarelletsa ho beha ka nako mefuta tshwaetso 'maloa: Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, Candida, trichomonas, cytomegalovirus, ureaplasma urealitikum, herpes 1st le 2nd mofuta, qhoshola papillomavirus. Theko ea phumano ena ranges ho tloha li-ruble 2.000 ho 3.500. ho itšetlehile ka tleliniking, thepa le thepa, hammoho le ho mofuta oa and analysis: ya boleng kapa ditirisanommogo. Ke eng e hlokahalang boemong ba hao - ngaka etsa qeto. Maemong a mang, u feela feela ho lemoha ho ba teng ha pathogen batho ba bang, jwalo ka HIV, ho bohlokoa karolo e bapaloang ke titer ditirisanommogo. bitsoa "PCR ho hlahloba 12" ka tepelletse maikutlong ho tsohle tse ka holimo likokoana-hloko hlahloba.

Deciphering liphello and analysis

Mongwalollo PCR and analysis ke e tobileng. Ho na le 2 feela index ea tekanyo e - ". Mpe" "positive," le Holim 'a ba bonoa ba pathogen ea ka lingaka le 99% ho ba le kholiseho -th netefatse ho ba teng ha lefu lena le le ho qala kalafo ya le mamello. Ka mokhoa ditirisanommogo tsa lekanngwang tshwaetso ka lekanang lenaneng la index ea nomoro ea libaktheria lemoha tla boletseng. Feela ngaka ka hore na isa tekanyong ea lefu lena le le ho laela le kalafo e hlokahalang.

Maemong a mang, ho etsa mohlala ka qeto ea hore na tšoaetso ea HIV ka ho PCR, ka lebaka mpe, ho hlokahala bakeng sa dipatlisiso tse eketsehileng ho tiisa hore lipalo tsena.

Moo ho ea hlahloba?

Moo feta-PCR and analysis ka Tleliniki setjhaba kapa laboratori ea lekunutu? Ka bomalimabe, ka masepala minganga thepa le mekhoa hangata siiloe ke nako. Ka lebaka leo, ho molemo ho fana ka ratang ho dilaboratiriamong poraefete le thepa morao-rao le basebetsi haholo ba tšoanelehang. Ho phaella moo, ka Tleliniki ya poraefete o fumana liphello e haholo ka lebelo.

Ka Moscow, batho ba bangata dilaboratiriamong poraefete fana PCR and analysis bakeng sa tšoaetso ea tse fapa-fapaneng. Ka mohlala, ka litleliniking tse kang "Vita", "go lotagantswe Clinic," "Thabo ka Lapeng", "Uro-Pro", o atlehe PCR hlahlojoe. theko Survey ke 200 li-ruble. ho beha e pathogen.

E ka etsa qeto ea hore ho fumanoe mafu a tšoaetsanoang ka ho PCR maemong a mangata ke tsela e bonolo, kahoo ka tšeptjoang ea e batlang e pathogen 'meleng ka mekhahlelo ea pele ea tshwaetso. Leha ho le joalo, maemong a itseng, ho khetha mekhoa e meng ea tepelletse maikutlong. Bona hore ho hlokahala hore joalo ho khanneloa thuto ea ka feela ba le setsebi. PCR and analysis tshirololo hape hloka mokhoa litsebi. Latela keletso ngaka ea hao 'me u se ke ua fana ka liteko tsa bona, tse sa ho hlokahala.